BioReady Урацил ДНК гликозилаза (UDG)

  Урацил-ДНК-гликозилаза BioReady (UDG) получена путем рекомбинантного клонирования и экспрессии в Escherichia coli. Она эффективно гидролизует урацил (U) в одноцепочечной или двухцепочечной ДНК длиной более 6 пар оснований, не проявляя активности в отношении РНК. Ее основное применение — предотвращение загрязнения продуктов ПЦР-амплификации. Она работает путем замены dTTP на dUTP в реакции ПЦР, создавая продукты ПЦР-амплификации, содержащие основания dU. Затем UDG расщепляет основания dU в этих продуктах амплификации, создавая абазические сайты, предотвращая использование цепи ДНК в качестве матрицы для последующей ПЦР, тем самым достигая цели предотвращения загрязнения продуктов ПЦР. Кроме того, эта UDG становится неактивной на последующем этапе предварительной денатурации при 95°C, не влияя на амплификацию матрицы.

Описание

    BioReady Uracil DNA Glycosylase катализирует высвобождение свободного урацила из более длинной, чем 6bp dU-содержащей одноцепочечной или двухцепочечной ДНК, тогда как РНК и нормальная dT-содержащая ДНК. UDG вырезает урацил из dU-содержащего продукта ПЦР, когда dTTP заменяется на dUTP, который был включен в ДНК. Полученные абазические сайты блокируются от репликации с помощью ПЦР. Он в основном используется для предотвращения загрязнения продуктов амплификации ПЦР. Этот фермент может быть полностью и необратимо инактивирован после при температурах выше 95°C.

Состав набора:

Cat#

BSA54S1

BSA54S1

Components 

1000 U

5000 U

BioReady Uracil DNA Glycosylase (5 U/µL) 

200 µL 

1 ml 

Область применения

  • Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

  • Сайт-направленный мутагенез

  • Клонирование

  • Секвенирование

  • Генотипирование

  • Анализ экспрессии генов

Случаи применения

1. Реакция ПЦР с УДГ и без УДГ, амплификация матриц, содержащих урацил (У), оценивалась после расщепления при 37°С в течение 2 минут.

 

CT value

 

1

2

3

qPCR (with UDG)

34.90

34.31 

34.97 

qPCR(No-UDG control)

17.78 

17.94 

17.77

Результаты: Результаты показывают, что BioReady Uracil-DNA Glycosylase обладает значительной активностью в деградации продуктов ПЦР, содержащих урацил (U). При использовании продуктов ПЦР, содержащих U, в качестве матриц, средний Ct амплификации в реакциях qPCR без UDG составляет 17,83, тогда как в реакциях qPCR с добавлением UDG средний Ct амплификации составляет 34,73. Разница составляет 16,9, что указывает на более чем 100 000-кратное снижение загрязненных продуктов ПЦР.

Условия хранения

  • Комплект необходимо отправлять в охлажденном виде.
  • Хранение набора: хранить в холодильнике при температуре -20°C в защищенном от света месте, повторное замораживание и размораживание не должно превышать 7 раз.
  • Срок действия: 12 месяцев, пожалуйста, используйте в течение срока действия

Информация для заказа

Кат. №

Название

Упаковка

BSA54S1

BioReady Uracil DNA Glycosylase (UDG)

1000U

BSA54M1

BioReady Uracil DNA Glycosylase (UDG)

5000U