BioReady Термолабильный UDG

 Термочувствительная урацил-ДНК-гликозилаза (UDG) BioReady получена путем рекомбинантного клонирования и экспрессии в Escherichia coli. Она эффективно гидролизует урацил (U) в одноцепочечной или двухцепочечной ДНК длиной более 6 пар оснований, не проявляя активности в отношении РНК. Ее основное применение — предотвращение загрязнения продуктов ПЦР-амплификации. Она работает путем замены dTTP на dUTP в реакции ПЦР, создавая продукты ПЦР-амплификации, содержащие основания dU. Затем UDG расщепляет основания dU в этих продуктах амплификации, создавая абазические сайты, предотвращая использование цепи ДНК в качестве шаблона для последующей ПЦР, тем самым достигая цели предотвращения загрязнения продуктов ПЦР. Кроме того, эта термочувствительная UDG становится неактивной на последующих этапах обратной транскрипции при 50 °C или предварительной денатурации при 95 °C, не влияя на амплификацию шаблона.

Описание

   BioReady Термолабильная UDG (Урацил-ДНК-гликозилаза) катализирует высвобождение свободного урацила из более длинной, чем 6bp dU-содержащей одноцепочечной или двухцепочечной ДНК, тогда как РНК и нормальная dT-содержащая ДНК. UDG вырезает урацил из dU-содержащего продукта ПЦР, когда Dttp заменяется на dUTP, который был включен в ДНК. Полученные абазические сайты блокируются от репликации с помощью ПЦР. Он в основном используется для предотвращения загрязнения продуктов ПЦР-амплификации. Этот фермент чувствителен к теплу. Он может быть полностью и необратимо инактивирован через 10 минут при температуре выше 50°C.

Компоненты

Catalog number

BSA51S1

BSA51M1

Components

200U

1000U 

BioReady Heat-labile UDG (I U/ВµL) 

200 µL

I mL 

Характеристики

  • Термочувствителен, инактивируется при нагревании до 50°С в течение 10 минут.
  • Широкая применимость, совместимость с одношаговыми системами ОТ-ПЦР.

Область применения

  • Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

  • Сайт-направленный мутагенез

  • Клонирование

  • Секвенирование

  • Генотипирование

  • Анализ экспрессии генов

Случаи применения

   Эксперименты проводились с использованием одношаговых реагентов ОТ-ПЦР с использованием и без использования термочувствительной урацил-ДНК-гликозилазы BioReady (BSA51) для оценки амплификации матриц, содержащих урацил (U), после расщепления при температуре 25°C в течение 2 минут.

   Результаты:Результаты показывают, что BioReady Thermosensitive Uracil-DNA Glycosylase (UDG) эффективно разрушает продукты ПЦР, содержащие урацил (U). В присутствии продуктов ПЦР, содержащих U, одношаговая ОТ-ПЦР без UDG имела среднюю амплификацию Ct 29,66, тогда как одношаговая ОТ-ПЦР с включением термочувствительной UDG не показала никакой амплификации вообще.

Условия хранения

  • Комплект необходимо отправлять в охлажденном виде.
  • Хранение набора: хранить в холодильнике при температуре -20°C в защищенном от света месте, повторное замораживание и размораживание не должно превышать 7 раз.
  • Срок действия: 12 месяцев, пожалуйста, используйте в течение срока действия .

Информация для заказа

Кат. №

Название

Упаковка (кол. тестов)

BSA51S1

BioReady Heat-labile UDG

200

BSA51M1

BioReady Heat-labile UDG

1000